Hej där, mikroskopientusiaster! Som leverantör av Top - NotchTrinokulär ljusmikroskop, Jag är superstockad för att dela lite insikter om hur man får ut det mesta av de olika belysningslägen på dessa fantastiska enheter.
Förstå grunden för belysning i ett trinokulärt ljusmikroskop
Innan vi dyker in i de specifika belysningslägen, låt oss snabbt gå över varför belysning är så avgörande. I ett trinokulärt ljusmikroskop är korrekt belysning det som gör att vi kan se de små detaljerna i proverna tydligt. Det är som att lysa en strålkastare på en scen för att avslöja alla skådespelare och deras rörelser.
Den trinokulära designen ger oss en extra okular, som ofta används för att fästa en kamera. Det här är bra för att ta bilder eller spela in videor av det vi ser. Men utan rätt belysning kommer dessa bilder och videor inte att bli bra.
Brightfield -belysning
Brightfield -belysning är det vanligaste och enkla läget. Det är som att slå på en vanlig glödlampa i ett rum. I detta läge placeras provet på scenen och ljuset passeras direkt genom det underifrån. Ljuset som passerar genom provet kommer in i objektivlinsen och når sedan våra ögon eller kameran.
Detta läge är perfekt för prover som är färgade eller har en naturlig kontrast. Om du till exempel tittar på en bild av färgade bakterier kommer Brightfield -belysning att få bakterierna att sticker ut mot bakgrunden. För att använda BrightField -belysning, slå helt enkelt på ljuskällan, vanligtvis belägen vid mikroskopets bas och justera intensiteten vid behov. Du kan också använda kondensorn för att fokusera ljuset på provet.
En sak att tänka på är att om ditt prov är för transparent eller har låg kontrast, kanske ljusfältbelysning kanske inte visar dig mycket. I sådana fall måste du prova andra belysningslägen.
Darkfield -belysning
Darkfield -belysning är lite mer intressant. Istället för att lysa ljus direkt genom provet, lyser det upp provet från sidorna. Detta skapar en mörk bakgrund, och exemplet verkar ljust mot det. Det är som att titta på stjärnor på natthimlen.
För att ställa in Darkfield -belysning behöver du en Darkfield -kondensor. Denna kondensator blockerar de centrala ljusstrålarna och tillåter endast de perifera strålarna att nå provet. När dessa perifera strålar träffar provet är de spridda, och det spridda ljuset är vad vi ser.
Darkfield -belysning är utmärkt för att observera levande, ostänkta prover som protozoer eller små organismer i vattenprover. Det kan avslöja detaljer som kan missa i Brightfield -belysning, till exempel rörelse av cilia eller flagella.
Faskontrastbelysning
Faskontrastbelysning är ett spel - växlare när det gäller att observera transparenta prover. Många biologiska exemplar, som levande celler, är mestadels transparenta, och det är svårt att se deras inre strukturer med ljusfältbelysning.
Faskontrast fungerar genom att konvertera skillnader i provets brytningsindex till skillnader i ljusstyrka. Enkelt uttryckt gör det de inre strukturerna i provet mer synliga. För att använda faskontrastbelysning behöver du en faskontrast objektivlins och en matchande kondensor ring.
Faskontrastmålet har en speciell fasplatta som förskjuter fasen av ljuset som passerar genom provet. När detta skiftade ljus kombineras med det oskiftade ljuset skapar det kontrast. Detta läge används ofta i cellbiologisk forskning för att studera celldelning, cellrörelse och andra cellulära processer.
Differentialstörningskontrast (DIC) belysning
DIC -belysning, även känd som Nomarski -störningskontrast, är ett annat avancerat belysningsläge. Det ger ett trehimensionellt utseende på provet, vilket gör att det ser mer ut som ett verkligt livsobjekt.
DIC fungerar genom att dela upp en ljusstråle i två stigar. En väg passerar genom provet, och den andra passerar genom ett referensområde. När de två strålarna rekombineras stör de varandra och skapar kontrast baserat på skillnaderna i den optiska väglängden.
Detta läge är utmärkt för att observera ytfunktioner och interna strukturer för prover i hög upplösning. Det används ofta i materialvetenskap för att studera mikrostrukturen för metaller och i biologisk forskning för att observera de fina detaljerna i celler och vävnader.
Fluorescensbelysning
Fluorescensbelysning är en kraftfull teknik som används för att visualisera specifika molekyler eller strukturer i ett prov. Det fungerar genom att använda en speciell ljuskälla, vanligtvis en kvicksilver eller xenonlampa, för att väcka fluorescerande färgämnen eller proteiner i provet.
När dessa fluorescerande molekyler är upphetsade avger de ljus vid en annan våglängd, som sedan detekteras av mikroskopet. För att använda fluorescensbelysning behöver du en fluorescensfilteruppsättning som matchar excitations- och emissionvåglängderna för fluorescerande färgämne.
Fluorescensbelysning används ofta inom molekylärbiologi, immunologi och neurovetenskap. Till exempel kan det användas för att märka specifika proteiner i celler eller för att spåra rörelsen av molekyler inom en levande organisme.
Välja rätt belysningsläge
Nu när du vet om de olika belysningslägen, hur väljer du rätt? Det beror på ditt prov och vad du vill observera.
Om du arbetar med färgade exemplar är Brighfield -belysning vanligtvis en bra utgångspunkt. För levande kan oskattade exemplar, mörkfält eller faskontrast vara bättre. Om du behöver hög upplösning, tre -dimensionella bilder är DIC ett bra alternativ. Och om du är intresserad av att visualisera specifika molekyler är fluorescensbelysning vägen att gå.
Använda kameran med olika belysningslägen
Om du använder enTrinokulär mikroskop 2000xoch har bifogat en kamera med enTrinokulär mikroskopkameraadapterDu vill se till att kamerainställningarna justeras för varje belysningsläge.
I Brightfield -belysning kan du till exempel behöva justera vitbalansen och exponeringstiden för att få en tydlig bild. Vid fluorescensbelysning måste du ställa in kameran för att fånga den specifika utsläppsvåglängden för fluorescerande färgämne.
Underhåll och felsökning
För att säkerställa att dina belysningslägen fungerar korrekt är regelbundet underhåll viktigt. Håll ljuskällan ren och byt ut glödlamporna när de börjar dimma. Kontrollera kondensatorer, filter och fasplattor för skador eller smuts.
Om du har problem med belysningen, till exempel ojämn belysning eller låg kontrast, kontrollera först kondensorns inriktning och objektivlinsen. Se till att ljuskällan är korrekt justerad och att filtren är i rätt position.
Slutsats
Sammanfattningsvis erbjuder de olika belysningslägen på ett trinokulärt ljusmikroskop ett brett spektrum av möjligheter för att observera prover. Oavsett om du är student, en forskare eller en hobbyist, att förstå hur du använder dessa lägen kan ta din mikroskopiupplevelse till nästa nivå.
Om du är intresserad av att köpa ett trinokulärt ljusmikroskop eller behöver mer information om våra produkter, känn dig fri att nå ut. Vi är här för att hjälpa dig hitta det perfekta mikroskopet för dina behov och ge dig allt stöd du behöver för att få ut det mesta av det.
Referenser
- Murphy, DB (2001). Grundläggande av ljusmikroskopi och elektronisk avbildning. Wiley - Liss.
- Inoué, S., & Spring, KR (1997). Videomikroskopi: Grunderna. Plenumpress.
