Slide Mount -instruktioner
Innan du börjar bildförberedelseprocessen ska du se till att du har samlat alla nödvändiga material, inklusive bilder, täcklips, droppar eller rör, och eventuella kemikalier eller fläckar du tänker använda.
Det finns två primära typer av bilder du kommer att arbeta med:
1. Den vanliga plattglasbilden.
2. Depressionen eller brunnskilden, som har en liten brunn eller intryck i centrum som är utformat för att hålla en droppe vatten eller flytande substans. Dessa är vanligtvis dyrare och används vanligtvis utan täcklip.
Standardglas kan tillverkas av antingen plast eller glas, mäta 1 x 3 tum (25 x 75 mm) i storlek och 1 till 1,2 mm i tjocklek.
För våta objektglas är ett täckglas eller täckglas viktigt. Detta är en ultratunn, fyrkantig glasbit (eller plast) som är noggrant placerad över provdroppen. Utan locket skulle ytspänningen få droppen att bilda en kupolform. Täckningen räknar med denna spänning, vilket säkerställer att provet ligger platt för exakt undersökning med minimal fokusering. Dessutom fungerar täckningen som en skydd, vilket förhindrar att objektivlinsen stör provet.
Mikroskoplidfästen
Mikroskopfästen hänvisar till de metoder som används för att säkra mikroskopglas eller prover för observation. Det finns främst fyra typer:
1. Slidfästen:Dessa är den vanligaste typen och involverar placering av ett prov på en platt glasskiva, ofta med ett monteringsmedium (som en vätska eller gel) för att hålla den på plats. En täcklipning läggs sedan till för att skydda provet och ge en plan yta för visning.
2. Kavitet eller brunnsfästen:Dessa objektglas har en liten brunn eller depression i mitten, utformad för att hålla en droppe vätska, såsom vatten eller en specialiserad monteringsvätska. De används när de arbetar med prover som kräver nedsänkning i en vätska.
3. Tillfälliga fästen:Dessa fästen är inte avsedda för långvarig lagring eller observation. De involverar enkla och snabba metoder som att placera ett prov på en bild med en droppe vatten. De används ofta för att observera levande organismer eller tidskänsliga prover.
4. Permanenta fästen:Dessa är utformade för långvarig lagring och observation. De involverar mer komplexa procedurer, inklusive användning av specialiserade monteringsmedier som härdar över tid, inkapslar provet i ett transparent medium. Denna typ av montering används ofta för utbildningsbilder och vetenskaplig forskning.
Varje typ av montering har sina specifika tillämpningar och väljs baserat på provets natur och observationens syfte.
Fyra vanliga sätt att montera en mikroskoprutschbana
Det finns flera vanliga metoder för att montera en mikroskopglas, beroende på typ av prov och syftet med observation. Här är fyra vanliga sätt att montera en mikroskopglas:
Torrmontering:
Förfarande: I denna metod placeras ett prov direkt på en ren, torr mikroskop. Det används ofta för prover som inte kräver ytterligare fukt eller nedsänkning i en vätska.
Tillämpningar: Torrmontering är lämplig för att observera fasta prover som växtdelar, hår eller mineraler.
Våt montering:
Förfarande: En liten droppe vätska (vanligtvis vatten eller en specialiserad monteringsvätska) placeras på bilden, och provet läggs sedan till i denna droppe. En täckningsslip placeras försiktigt över provet för att förhindra torkning och snedvridning.
Tillämpningar: våta fästen används för att observera levande organismer, celler eller prover som kräver nedsänkning i en vätska.
Squashmontering:
Procedur: Denna teknik innebär att placera ett prov på en bild och sedan försiktigt trycka ner den med en täckskjutning eller en annan bild för att platta den. Detta används vanligtvis för mjuka vävnader eller känsliga växtdelar för att skapa ett tunt, transparent skikt för observation.
Tillämpningar: Squashfästen används för att undersöka vävnader, särskilt i växtbiologi.
Smetmontering:
Förfarande: En liten mängd av provet (vanligtvis ett flytande eller halv-vätsketämne) sprids tunt och jämnt över en bild, ofta med kanten på en annan bild. Det är sedan tillåtet att lufttorka eller kan fixas med ett kemiskt medel.
Tillämpningar: Stremmonter används ofta för att observera mikroorganismer som bakterier eller för att framställa blodutstryk för mikroskopi.
Dessa metoder tillgodoser olika typer av prover och deras specifika krav för observation. Valet av monteringsteknik beror på faktorer som provets natur, observationens syfte och den önskade detaljnivån och tydligheten.
Mikroskopfläckar
Mikroskopfläckar, även kända som biologiska fläckar eller färgämnen, är ämnen som används i mikroskopi för att förbättra kontrasten och synligheten hos biologiska prover. De fungerar genom att selektivt binda till specifika cellulära komponenter, såsom proteiner, nukleinsyror eller lipider, vilket möjliggör enklare visualisering och differentiering av cellstrukturer. Här är några vanliga typer av mikroskopfläckar:
1. Hematoxylin och eosin (H&E):
Typ: Kombinationsfläck.
Användning: En av de mest använda fläckarna i histologi, hematoxylinfläckar cellkärnor blå-lila, medan eosin fläckar cytoplasma och vissa extracellulära strukturer rosa.
2. Metylenblå:
Typ: Grundläggande färgämne.
Användning: Fläckar Cellkärnor blå. Det används vanligtvis för allmänna cytologi- och mikrobiologiska studier.
3. Giemsa:
Typ: Kombinationsfläck.
Användning: Används för att färga blodceller, det differentierar nukleära och cytoplasmiska komponenter i ett antal färger, vilket möjliggör identifiering av olika celltyper.
4. Gramfläck:
Typ: Kombinationsfläck.
Användning: skiljer mellan två huvudkategorier av bakterier: Gram-positiva (som behåller kristallviolettfläcken) och Gram-negativ (som tar upp Safranin-försämringen).
5. Wrights fläck:
Typ: Kombinationsfläck.
Användning: Den här fläcken som främst används för blodutstryk, möjliggör differentiering av blodcelltyper och identifiering av avvikelser.
6. Lugols jod:
Typ: Jodbaserad fläck.
Användning: Används i samband med Grams jod kan den användas för att förbättra kontrasten hos vissa cellulära strukturer.
7. Oljeröd o:
Typ: lipofil färgämne.
Användning: binder specifikt till lipider, vilket gör det användbart för färgning av strukturer som fettdroppar i cellerna.
8. periodisk syra-schiff (PAS) % 3a
Typ: Kemisk reaktionsbaserad fläck.
Användning: reagerar med kolhydrater, belyser strukturer som glykogen, muciner och andra glykoproteiner.
9. Toluidinblå:
Typ: Grundläggande färgämne.
Användning: Syra -komponenter i celler och vävnader, inklusive mastcellgranulat och nukleinsyror.
10. Safranin:
Typ: Grundläggande färgämne.
Användning: Används som en försämring i Gram-färgning för att färga gram-negativa bakterier.
Det här är bara några exempel, och det finns många andra specialiserade fläckar som används för specifika ändamål i mikroskopi, såsom speciella fläckar för bindväv, nervfibrer eller specifika cellstrukturer. Valet av fläckar beror på typen av prov och den information som behövs från den mikroskopiska undersökningen.
Mikroskopfärgningssteg
1. Börja med att förbereda en våtmonterad bild och placera ditt prov på ett rent mikroskopglas.
2. Använd en ögondroppare eller pipett och samla försiktigt en droppe av den valda fläcken.
3. Placera denna droppe fläck på ytterkanten på din täckslip, vilket säkerställer att den kontaktar glidens kant.
4. För att underlätta den jämn fördelningen av fläcken, placera en bit servett eller pappershandduk längs motsatt sida av locket och pressa den ordentligt mot kanten.
5. Använd vid behov ytterligare en fläckfall för att garantera fullständig täckning av ditt prov.
6. Din bild är nu fullt förberedd för observation under mikroskopet.
